HYBRIDATION IN SITU : DEUX EXEMPLES D'APPLICATIONS
Auteurs : ACCART N1, NOURTIER V1, ROOKE R1L'hybridation in situ (HIS) est une technique permettant de localiser sur du matériel tissulaire une séquence d'acides nucléiques en utilisant comme sonde une séquence de bases complémentaires dans laquelle a été incorporé un marqueur identifiable au microscope. La spécificité de l'appariement est très forte et peut être appliquée à la recherche d'une séquence d'ADN ou d'ARN. La première application présentée entre dans le cadre d'un projet de thérapie génique somatique dans le traitement de la myopathie de Duschesnes. L'HIS dans le contexte de ce projet a permis la détection d'un ADN plasmidique sur des coupes de muscle. Nous avons démontré la possibilité de combiner la technique d'HIS à une technique d'immunohistochimie (IHC). La seconde application présentée concerne la détection d'une séquence d'ARN messager dans le cadre d'un projet d'immunothérapie du cancer. La mucine 1 humaine (MUC-1) exprimée de façon aberrante sur plusieurs types de tumeurs, est l'antigène ciblé par la vaccination. Dans ce contexte, 1'HIS permet de mettre en évidence l'ARNm de la forme vaccinale du gène muc-1 et de la différencier de la forme endogène des transcrits MUC-1.