Quantification des opiacés, cocaïniques et amphétaminiques par chromatographie liquide haute performance / spectrométrie de masse en tandem aprés préparation en ligne de l'échantillon
Auteurs : LACROIX C1, SAUSSEREAU E1, BODIN G1, GOULLE J1- Objectif: Une méthode de dosage de substances stupéfiantes et de médicaments morphiniques par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (CL-SM/SM), après déprotéinisation acide et extraction-purification en ligne, a été développée au sein de notre laboratoire. Méthodes : Le système utilise deux pompes (Alliance 2795 et 1525 Micro, Waters), une vanne 6 voies de commutation, une colonne de concentration-purification Oasis HLB (Waters) et une colonne analytique en phase inverse (C18 Atlantis, Waters). Les différents composés retenus sur l'Oasis HLB, sont élués à contre courant sur la colonne analytique puis séparés par chromatographie. L'acquisition des données en spectrométrie de masse s'effectue en mode MRM (multiple reaction monitoring). La durée totale d'un cycle analytique est de 16 minutes. Résultats : La méthode développée est sensible, spécifique et linéaire de 2,5 à 200 ng/mL pour les molécules non conjuguées, et de 5 à 200 ng/mL pour les métabolites glucuroconjugués. Les limites de détection s'échelonnent de 0,2 à 1,3 ng/mL pour les molécules non conjuguées, et de 1,5 à 2,5 ng/mL pour les glucuroconjugués. Conclusion : Cette méthode, simple et rapide, de préparation en ligne des échantillons couplée à la CL-SM/SM permet de quantifier simultanément, dans le plasma, sérum, sang total, ou les urines, des molécules de différentes familles : opiacés et glucuroconjugués, amphétaminiques, cocaïniques, buprénorphine et norbuprénorphine.