Cet article est le rapport d'une commission SFSTP sur la validation d'une méthode rapide de comptage microbiologique et ses applications au domaine pharmaceutique. Il décrit le système Microcount digital, une méthode utilisant la bioluminescence pour le dénombrement des micro-organismes aérobies totaux dans les eaux utilisées dans l'industrie pharmaceutique. Une évaluation a été menée par six entreprises afin de comparer la méthode Microcount à la méthode par filtration sur membrane recommandée par la Pharmacopée européenne. Les critères de validation tels que spécificité, linéarité, précision, limites de détection et de quantification et robustesse ont été reprises des recommandations ICH et SFSTP sur la validation des méthodes analytiques. Il a été montré que la méthode utilisant le système Microcount donnait des résultats sensiblement équivalents à ceux obtenus avec la méthode de référence pour les différents critères examinés. Pour les eaux peu contaminées, il n'existe pas de différence significative entre les résultats obtenus par la méthode Microcount digital et la méthode de référence. L'étude a montré l'impact de l'erreur due à l'homogénéité de l'échantillon sur la validation et l'interprétation des résultats, Il existe donc une réelle nécessité de développement de critères de validation spécifiques pour les méthodes microbiologiques.