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Mise au point et validation du screening sanguin par chromatographie liquide en haute résolution : application à un cas clinique

Auteurs : Lelong J, Brunet B, Venisse N, Dupuis N, Sauvageon Y, Mura PDate 2017 Mai, Vol 29, Num 2, Supplement, pp S49-S49Revue : Toxicologie Analytique et CliniqueDOI : 10.1016/j.toxac.2017.03.066
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Résumé

ObjectifProposer une méthode d’extraction et de validation pour le screening sanguin par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse à haute résolution (UPLC-HRMS) avec une mise en application à un décès par injection accidentelle d’atracurium.MéthodeLa mise au point de l’extraction et la validation ont été réalisées avec des contrôles de qualité interne (CQI), comprenant 10 molécules (amiodarone, cyamémazine, diazépam, MDMA, hydroxyzine, mirtazapine, morphine, nordiazépam, propranolol et venlafaxine). Ces molécules ont été choisies en fonction de leur rapportm/z, de leur temps de rétention, de leur classe thérapeutique et de leur mode d’ionisation. Trois niveaux de concentration (2,20 et 100 ng/mL) ont été analysés par UPLC-HRMS avec un système Waters Xevo-G2 XS Qtof sur une colonne acquity UPLC®HSS C18, 1,8 μm. Plusieurs méthodes d’extraction ont été étudiées, l’extraction en phase solide (SPE), l’extraction en phase liquide (LLE), l’extraction liquide–liquide sur support solide (SLE) et la déprotéinisation. L’efficacité de chaque extraction a été évaluée en comparant le nombre de molécules extraites et l’aire des pics. L’aire du pic a été utilisée pour mesurer la répétabilité et la fidélité intermédiaire (FI) puisque la méthode est uniquement qualitative. La méthode finale a été utilisée pour l’analyse d’un échantillon sanguin d’un patient ayant reçu accidentellement de l’atracurium à la place de la trimébutine.RésultatsL’étude a montré que l’intensité du pic pour la SPE, la LLE et la déprotéinisation est satisfaisante. Avec la SPE et la LLE des aires plus importantes sont obtenues pour la plupart des molécules, en moyenne 30 % supérieures aux aires obtenues par déprotéinisation pour un CQI à 100 ng/mL, sauf pour l’amioda...

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 Source : Elsevier-Masson
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Lelong J, Brunet B, Venisse N, Dupuis N, Sauvageon Y, Mura P. Mise au point et validation du screening sanguin par chromatographie liquide en haute résolution : application à un cas clinique. Toxicologie Analytique et Clinique. 2017 Mai;29(2):S49-S49.
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Dernière date de mise à jour : 30/04/2017.


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