Le dosage plasmatique de l'hémoglobine libre s'effectue par mesure spectrophotométrique directe en utilisant la courbe différentielle d'ordre 2. La méthode est simple, rapide, d'une bonne précision et permet de détecter 1 mg/L d'hémoglobine. Conjugué au dosage de la bilirubinémie, il permet de différencier les hémolyses intra- et extravasculaires. La détection d'hémoglobine dans le plasma permet aussi de contrôler des traitements susceptibles d'entraîner une hémolyse ou de préciser la qualité des plasmas destinés à la transfusion. L'hémoglobinurie s'observe dans les cas où la concentration plasmatique d'hémoglobine dépasse les capacités de fixation de l'haptoglobine.