IntroductionLes céramides sont reconnues comme des régulateurs négatifs de la voie de signalisation de l’insuline en inhibant la protéine kinase B (PKB/Akt) par deux mécanismes distincts : le premier impliquant la protéine kinase C ζɛτα (PKCζ), et l’autre la protéine phosphatase 2A (PP2A). Nous avons émis l’hypothèse que l’action des céramides,viala PKCζ ou la PP2A, pourrait dépendre de l’organisation structurelle de la membrane plasmique, et plus spécifiquement de l’abondance en domaines riches en cavéolines (CEM).Matériels et MéthodesNous avons utilisé un mutant inactif de la PKCζ ou un inhibiteur de la PP2A, l’acide okadaïque (OKA), pour inhiber sélectivement les voies dépendantes de ces protéines dans des cellules exprimant différents niveaux de cavéoline-1, et évalué l’impact de l’insuline et des céramides sur l’activité de la PKB/Akt dans différent sub-domaines de la membrane plasmique.RésultatsBien que la voie de la PKCζ activée par les céramides dans les CEM soit dominante dans les adipocytes, une activation marginale de la voie dépendante de la PP2A, inhibée par l’OKA, a aussi été découverte à l’extérieur des CEM. Pour tester l’importance de ces CEM pour diriger l’action des céramides sur la PKB/Akt, nous avons utilisé des pré-adipocytes qui en sont dépourvus et avons constaté une évolution de l’action négative des céramides sur la PKB/Akt vers la voie PP2A dans ces cellules. De plus, dans des fibroblastes possédant des niveaux faibles de CEM, la voie impliquant la PP2A activée par les céramides dominait, mais pouvait être substituée par la voie dépendante de la PKCζ après surexpression de la cavéoline-1 dans les cellules.ConclusionNos résultats montrent que les céramides peuvent agir négativement sur la PKB/Akt,viadeux mécanismes différents, dépendant de la présence de CEM à la membrane, suggérant un rôle critique de ces domaines dans ce processus.