IntroductionLes cellules sécrétoires des glandes de la sous-muqueuse de l’épithélium respiratoire sont la source essentielle du mucus qui est contenu dans les granules de sécrétion. Nous proposons d’étudier l’implication de CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) sur le contenu en eau et en ions ainsi que sur l’expansion des granules sécrétoires de cellules glandulaires trachéales humaines mucoviscidosiques (CF).MéthodesNotre étude est réalisée à partir de cellules glandulaires trachéales humaines normales (non-CF, cellules MM39) et mucoviscidosiques (CF, cellules KM4). La teneur en eau des granules sécrétoires est mesurée en microscopie électronique à balayage-transmission à partir de l’intensité champ sombre. Les concentrations ioniques (Cl, K, Na, Mg, P, S) des granules sécrétoires sont déterminées par spectroscopie de photons X. L’analyse dynamique de l’expansion des granules sécrétoires est réalisée à l’aide d’une station de vidéomicroscopie à contraste de phase.RésultatsNous observons une augmentation des concentrations ioniques dans les granules sécrétoires de cellules CF par rapport aux cellules non-CF, concomitant à une diminution de la teneur en eau (respectivement 69 % et 59 % d’eau dans les granules non-CF et CF). L’expansion des granules sécrétoires est déficiente pour les cellules CF contrairement aux granules de cellules non-CF. Pour vérifier l’implication directe de CFTR, nous avons incubé les cellules non-CF avec un inhibiteur de CFTR (CFTRinh^) et nous avons transfecté des cellules CF par un vecteur lentiviral codant pour l’ADNc de CFTR. L’inhibition de CFTR induit une augmentation du contenu en ions, une diminution du contenu en eau et altère l’expansion des granules sécrétoires. La correction des cellules CF par un vecteur lentiviral codant pour l’ADNc de CFTR, permet le rétablissement à la fois des contenus en eau et en ions ainsi que de l’expansion des granules sécrétoires.ConclusionsL’augmentation des concentrations ioniques, la déshydratation et la dérégulation de l’expansion des granules sécrétoires de cellules trachéales humaines CF sont dépendantes du canal chlore CFTR.