ButDes mécanismes inflammatoires locaux sont mis en cause dans la genèse des lésions de dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA). Les capacités pro inflammatoires des oxystérols ont ainsi été testées sur des cellules épithéliales pigmentaires en culture. La sécrétion d’IL-8, chémokine connue pour ses pouvoirs chimioattractif surles cellules de l’inflammation et pour son rôle pro-angiogénique a été particulièrement étudiée ainsi que les protéines impliquées dans le contrôle de sa sécrétion.Matériels et MéthodesDes cellules épithéliales pigmentaires en lignée (ARPE-19) ont été cultivées et traitées par différents oxystérols : le 7-cétocholestérol, le 7- betahydroxycholestérol et le 25-hydroxycholestérol (25-OH). Après 24 h et 48 h de traitement à différentes concentrations les surnageants étaient récupérés et un dosage de plusieurs cytokines a été réalisé d’une part avec une technique d’analyse multiplexée et d’autre part par méthode ELISA. L’implication de la voie des MAP-kinases dans la sécrétion d’IL-8 a été évaluée en utilisant des inhibiteurs spécifiques de cette voie U0126 et PD98059.RésultatsLe dosage a été réalisé par cytométrie en flux avec analyse simultanée de la sécrétion de 6 cytokines (IL-8, IL-1ß, IL-6, IL-10, TNF- αet IL-12). Seule la sécrétion d’IL-8 a été identifiée sous l’influence du 25-OH. Le 7-céto et le 7- βn’induisent pas la sécrétion d’IL-8. Ceci a été confirmé par les dosages avec la méthode ELISA qui montrent que seul le 25-OH stimule la sécrétion d’IL-8. L’utilisation des inhibiteurs spécifiques de la voie des MAP-kinases diminue la sécrétion d’IL-8 induite par le 25-OH. Les valeurs mesurées sont alors comparables à celles obtenues sur le surnageant de cellules non traitées.DiscussionL’IL-8 est la seule cytokine dont la sécrétion par les cellules ARPE-19 est stimulée et ce uniquement par le 25-OH. Cet oxystérol qui n’a par ailleurs aucun effet cytotoxique peut donc être considéré comme un promoteur de l’inflammation. La voie des MAP-kinases semble être une des voies de signalisation majeure impliquée dans le contrôle de la sécrétion d’IL-8 par les cellules ARPE-19.ConclusionLe 25-OH semble être un agent pro-inflammatoire qui favorise au travers de la sécrétion d’IL-8 le recrutement des cellules inflammatoires contribuant auxlésions observées dans la DMLA. Par ailleurs l’IL-8 possède aussi des propriétés pro-angiogèniques qui pourraient favoriser le développement des lésions néo vasculaires observées au cours de la DMLA.