La résolution des isomères optiques repose sur la propriété qu'ont certaines molécules à posséder un ou plusieurs carbones asymétriques. Différentes techniques de séparation des énantiomères par HPLC peuvent être utilisées: addition d'un composé chiral à la phase mobile, dérivation des énantiomères ou simple séparation sur colonne chirale. Nous avons retenu cette dernière technique pour la séparation des énantiomères de sept β-bloquants (aténolol, alprénolol, labétalol, nadolol, oxprénolol, pindolol et propranolol), et avons choisi la colonne chirale de type α₁-AGP. Les résultats ont montré qu'à chaque β-bloquant correspond une phase mobile bien spécifique. La longueur d'onde choisie est λ = 225nm et le débit de la phase mobile est fixé à 0,9ml/min. Dans un second temps, des applications ont été effectuées sur différents échantillons pour la détermination des isomères du propranolol et de l'aténolol.