Un essai pluricentrique préalable réalisé par la commission « Vitamines liposolubles » de la Société française de biologie clinique a montré la nécessité de standardiser les conditions analytiques du dosage par chromatographie liquide haute performance de l'α-tocophérol sérique ou plasmatique. Dans ce travail, nous étudions chacune des étapes constitutives des divers modes opératoires publiés : ajout de l'étalon interne, dénaturation des lipoprotéines plasmatiques et extraction de l'α-tocophérol libéré. Le choix du tocol comme étalon interne, nous permet d'obtenir une reproductibilité supérieure à celle mesurée après ajout d'acétate de rétinol ou d'acétate d'α-tocophérol. L'éthanol, utilisé dans un rapport volumique éthanol/eau ≥ 0,7, provoque une dénaturation des lipoprotéines supérieure à celle obtenue en présence de méthanol. Les rendements d'extraction de l'α-tocophérol par le n-hexane et le n-heptane sont comparables. Le n-hexane, utilisé dans des rapports volumiques solvant/phase aqueuse compris entre 1 et 2,5 suffit à extraire en une seule étape la presque totalité de l'α-tocophérol contenu dans des sérums normo ou hyperlipémiques. Dans les conditions analytiques choisies, les critères de qualité de la technique sont : limite de détection = 0,5 μmol/l, limite de linéarité = 750 μmol/l, répétabilité = 2,03% et reproductibilité = 4,76%. A l'issue de cet essai pluricentrique, nous proposons donc un mode opératoire optimisé pour le dosage de l'α-tocophérol dans les échantillons sériques ou plasmatiques.