Depuis le 16 janvier 2010, la législation relative à la biologie médicale impose la mise en place de l’accréditation selon la norme ISO 15189 pour tous les examens de biologie médicale, y compris pour les examens de biologie moléculaire. Ce travail s’inscrit dans cette démarche et vise à valider la recherche par PCR en temps réel de la mutation L858R du gène EGFR parfois retrouvée dans les cancers bronchiques non à petites cellules (CBNPC). Chez les patients atteints de CBNPC, la recherche de cette mutation permet d’orienter la thérapeutique dans la mesure où sa présence est associée à une meilleure sensibilité aux inhibiteurs de tyrosine kinase. En vue de l’accréditation de cet examen, nous avons suivi les recommandations dictées par le Cofrac (Comité français d’accréditation) et par l’INCa (Institut national du cancer). Ainsi, différents paramètres ont été validés : la vérification des amorces, la limite de détection, la sensibilité et la spécificité diagnostique, la répétabilité, la reproductibilité intra-laboratoire, la robustesse, la contamination inter-échantillons, la stabilité des réactifs et la comparaison de cette méthode à la méthode de référence (méthode de Sanger). Enfin, une étude des risques a mis en évidence certaines défaillances pour lesquelles des actions correctives seront mises en place. Un dossier de validation de méthode SH Form 44 sera complété avec ces résultats en vue de l’obtention de l’accréditation. Bien que longue et fastidieuse, la validation de méthode assure un examen réalisé dans des conditions optimales et vise à garantir la qualité des résultats rendus.