Chez les mammifères domestiques, le transit des spermatozoïdes dans le tractus femelle, ainsi que leur survie durant la période pré-ovulatoire, sont reconnus comme des éléments importants pour la réussite de l’insémination. Cependant, l’étude de ce transit est limitée par l’absence de méthode d’imagerie des spermatozoïdes in vivo. La visualisation des spermatozoïdes de bélier dans le tractus femelle de brebis a été possible grâce au couplage de la microscopie confocale fibrée et de l’utilisation de marqueurs fluorescents adaptés à l’observation in vivo, c’est-à-dire stables in vivo et marquant l’intégralité de la surface du spermatozoïde. Nos résultats montrent le rôle prédominant de la jonction utérotubaire, qui relie l’utérus à l’oviducte, dans la sélection des spermatozoïdes au cours du transit.