Validation de l'outil aequorine pour le dosage du calcium libre cytoplasmique par chimioluminescence chez Streptococcus pneumoniae.
Auteurs : Chapuy-Regaud S1, Jones HE, Campbell AK, Trombe MCStreptococcus pneumoniae est une bactérie pathogène extracellulaire, transformable par l'ADN en solution. Il a été montré que le transport du calcium joue un rôle clé dans sa croissance végétative, la compétence pour la transformabilité génétique et la virulence expérimentale. Afin de préciser la localisation du calcium dans la bactérie, nous avons cloné l'ADN complémentaire de l'apoaequorine dans le chromosome de Streptococcus pneumoniae. Ceci a permis la reconstitution du système aequorine in vivo et les mesures par chimioluminescence de la concentration cytoplasmique en calcium libre. La concentration cytoplasmique en calcium est de 2 μM à l'équilibre et peut atteindre 14 μM après addition de calcium dans la suspension bactérienne. Cette augmentation de la concentration intracytoplasmique en calcium libre en réponse à un gradient extérieur de calcium implique un transport actif sensible au DMB et dépend de la vitesse initiale du transport de calcium.