Utilisation d’un calibrateur pour quantifier les récepteurs d’adhérence du polynucléaire neutrophile par cytométrie en flux
Auteurs : Latger-Cannard V1, Regnault V, Dumas D, Virion JM, Schooneman JF, Stoltz JF, Lecompte TLes récepteurs d'adhérence représentent un élément essentiel aux interactions cellulaires hétérotypiques (cellule endothéliale, plaquettes) du polynucléaire neutrophile. La connaissance de leur niveau d'expression apporte des renseignements sur l'état d'activation et la fonctionnalité du polynucléaire neutrophile. L'utilisation de la cytométrie en flux associée à un calibrateur de l'immunomarquage, représenté par des billes de latex recouvertes de quantités déterminées d'immunoglobulines (Qifikit® Dako), permet de mesurer la capacité liante de l'anticorps spécifique et donc de renseigner sur la densité antigénique du récepteur analysé. L'application de cette méthodologie à l'exploration des principaux récepteurs d'adhérence, la L-sélectine (CD62L) et les β2-intégrines (CD11a-c/CD18), à la surface de polynucléaires neutrophiles au repos et incubés en présence des stimulus pro-inflammatoires, le formyl-méthionyl-leucyl-phénylalanine (fMLP) et le tumor necrosis factor a (TNFα), permet d'une part d'obtenir des valeurs d'expression basale et d'autre part d'étudier la réactivité des polynucléaires neutrophiles. Cette méthode de quantification est applicable à de nombreux domaines cliniques comme le diagnostic des déficits en récepteurs d'adhérence, les pathologies inflammatoire, infectieuse ou thrombotique.